
1、熱水浸提法
稱取20g白樺茸粉末,加入15-30倍量的水,在一定溫度下提取2-6h,抽濾、提取液適當(dāng)濃縮,加入約4倍濃縮液體積的95%乙醇,0℃靜置過夜,過濾、沉淀物放入電熱鼓風(fēng)干燥箱于60℃干燥,得到白樺茸粗多糖,多糖粗提物加熱蒸餾水復(fù)溶,加1/4體積Sevag溶液(將氯仿和正丁醇溶液按4:1比例混合)脫蛋白,糖液加入約4倍濃縮液體積的95%乙醇,0℃靜置過夜,抽濾,反復(fù)用丙酮洗滌,沉淀物放入電熱鼓風(fēng)干燥箱于60℃干燥備用。
為了確定白樺茸多糖水浸提法的最佳工藝條件,可以選擇浸提溫度(40℃、80℃、100℃)、浸提時(shí)間(2h、4h、6h)、料液比(1:20、1:25、1:30)和物料粒度(20-40目、40-60目、小于60目)為考察因素,以多糖得率和純度為考察指標(biāo),采用單因素實(shí)驗(yàn),做L9(34)正交試驗(yàn)方法對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。
最終確定了多糖的最優(yōu)方案為:提取溫度100℃,提取時(shí)間4h,料液比1:30,物 料粒度40-60目,得多糖得率和純度分別為1.841%、34.32%。

2、堿液提取法
稱取10g沸水浴提取后的固形物殘?jiān)尤?5-30倍量的水,在一定溫度下提取2-6h,離心、收集上清液,用1mol/L鹽酸中和提取液,適當(dāng)濃縮,加入約4倍濃縮液體積的95%乙醇,0℃靜置過夜,過濾、沉淀物放入電熱鼓風(fēng)干燥箱于60℃干燥,得到堿提白樺茸粗多糖,多糖粗提物加熱蒸餾水復(fù)溶,加1/4體積Sevag溶液(將氯仿和正丁醇溶液按4:1比例混合)脫蛋白,糖液加入約4倍濃縮液體積的95%乙醇,0℃靜置過夜,抽濾,反復(fù)用丙酮洗滌,沉淀物放入電熱鼓風(fēng)干燥箱于60℃干燥備用。中和所得沉淀物經(jīng)蒸餾水洗滌后,冷凍干燥得到褐色固形物即為堿提不溶粗多糖。
同樣的,為提高得率,可以在各種提取參數(shù)均采用水提多糖參數(shù)的前提下,選擇浸提堿液濃度(0.1moL/L、0.25moL/L、0.5moL/L、0.75moL/L、1moL/L)為考察因素,以多糖得率和純度為考察指標(biāo),對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。
確定了最終的最優(yōu)方案為:提取時(shí)堿液的濃度采取0.75moL/L,堿提可溶多糖為3.6%,純度為36.5%,堿提不溶粗多糖的得率為5.2%。為提高白樺茸多糖的提取效率,眾多研究者為此也做出了不懈努力。許泓瑜等利用響應(yīng)面法優(yōu)化得到了白樺茸多糖的最佳提取工藝為:溫度83℃,提取時(shí)間為2.2h,料液比為33.3:1,白樺茸多糖的提取率達(dá)到24.578%。

3、超聲-微波輔助提取法
白樺茸經(jīng)粉碎后,過40目篩,用體積分?jǐn)?shù)為80%的乙醇溶液在70℃條件下回流2次,每次3h,以有效去除部分醇溶性物質(zhì),然后1000r/min離心20min,去上清液,沉淀經(jīng)60℃真空干燥,得到預(yù)處理白樺茸粉。將預(yù)處理的白樺茸粉樣品置于與50W超聲波換能器緊密粘結(jié)的250ml玻璃萃取容器中,以水為溶劑,將換能器卡入微波腔中央底部,其產(chǎn)生直接超聲振動(dòng),與此同時(shí),磁控管發(fā)射天線上的微波通過波導(dǎo)管作用于樣品及溶劑。萃取容器通過轉(zhuǎn)換接頭與一球形冷凝管相連,受熱溶劑蒸汽經(jīng)冷凝管冷卻并回流至樣品容器。設(shè)定一定的萃取時(shí)間和微波輻射功率,開啟儀器,當(dāng)萃取完成后,再放置冷卻片刻取出,然后將提取液在1000r/min轉(zhuǎn)速下離心10min,合并上清液,之后將上清液進(jìn)行減壓濃縮,并用工業(yè)酒精調(diào)至含醇量為 80%,靜置過夜后離心,沉淀用無水乙醇洗滌3次,然后冷凍干燥即得粗多糖。
為了確定超聲-微波輔助提取白樺茸多糖的最佳工藝條件,利用響應(yīng)面分析法優(yōu)化超聲-微波提取白樺茸多糖參數(shù)。在單因素預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選擇提取時(shí)間(15min、20min、25min)、料液比(1:15、1:20、1:25)、微波功率(55W、85W、115W)作為因素,利用SAS軟件系統(tǒng)進(jìn)行響應(yīng)面分析, 設(shè)計(jì)了1個(gè)3因素3水平的二次回歸方程來擬合因素和指標(biāo)(響應(yīng)值)之間的函數(shù)關(guān)系。
固定料液比1:20不變時(shí),得出的最佳的工藝條件為:提取時(shí)間18.45~24.50min,微波功率88.3~96.7W。
綜上所述,白樺茸多糖一般采用傳統(tǒng)的熱水浸提或者加以一定的物理方法予以輔助,但是水浸提存在提取時(shí)間長和溫度高的缺點(diǎn)。為了進(jìn)一步提高白樺茸多糖得率和純度,應(yīng)該更多采用微波、超聲等物理方法輔助提取技術(shù)。
4、超臨界低溫萃取法
由北京西伯利亞白樺茸研發(fā)有限公司與俄羅斯西伯利亞天然野生植物有限公司共同開發(fā)的100%水溶性西伯利亞白樺茸提取物產(chǎn)品,率先將超臨界低溫萃取方法運(yùn)用于白樺茸多糖、樺褐孔菌醇等有用物質(zhì)的提取、純化,整個(gè)生產(chǎn)過程中在低溫環(huán)境下進(jìn)行,最大化保留白樺茸子實(shí)中的有用物質(zhì),以及多糖和其他有用物質(zhì)的生物活性。
低溫萃取是由結(jié)合剪力與振動(dòng)力效應(yīng)之低溫萃取技術(shù)、復(fù)合式微波萃取技術(shù)和超臨界二氧化碳萃取分離技術(shù)三項(xiàng)技術(shù)所整合而成。“低溫萃取技術(shù)”可根據(jù)原物料之特性與產(chǎn)品需求進(jìn)行組合調(diào)整,具有高效率、環(huán)保、安全與確保有效成分活性等優(yōu)點(diǎn),適用范圍相當(dāng)廣泛,操作溫度低于 60℃,可確保天然物中有效成分的活性,不使用有害人體之溶劑,以經(jīng)濟(jì)的方式進(jìn)行萃取分離,可充分保留其有效成分與香氣該技術(shù)具有其重要性與前瞻性。
“超臨界低溫萃取”利用超臨界流體的溶劑強(qiáng)度取決于萃取的溫度和壓力,只需要改變萃取劑流體的壓力和溫度,就可以把樣品中的不同組分按在流體中溶解度的大小,先后萃取出來,在低壓下弱極性的物質(zhì)先萃取,隨著壓力的增加,極性較大和大分子量的物質(zhì)與基本性質(zhì),所以在程序升壓下進(jìn)行超臨界萃取不同萃取組分,同時(shí)還可以起到分離的作用。
超臨界低溫萃取與超微破壁粉碎、低溫真空干燥工藝并被稱為當(dāng)前白樺茸提取的三大現(xiàn)代化工藝,由此生產(chǎn)的白樺茸產(chǎn)品具有純度高、有效性好、易吸收等特點(diǎn),真正實(shí)現(xiàn)珍稀資源白樺茸的高效利用,更好服務(wù)于人們的健康生活。

特別聲明:本文來源為《探秘白樺茸--來自西伯利亞的藥用真菌》一書;本文圖片引用自網(wǎng)絡(luò)圖片,如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系刪除。